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備用

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試劑的準(zhǔn)備

 20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1:20稀釋?zhuān)?份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

洗板方法

  1.   手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

  2.   自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

    操作步驟

  3.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

  4.   設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

  5.   樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

  6.   除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

  7.   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

  8.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

  9.   每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

    結(jié)果判斷

     繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

     

    試劑盒性能

  10.  準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。

  11.  靈敏度:最低檢測(cè)濃度小于1.0 pg/mL。

  12.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。

  13.  重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

  14.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

  15.  有效期:6個(gè)月

    免責(zé)聲明

  16.   試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。

  17.   嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。



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